Coombs Testi

Coombs testi nedir?

Coombs testi, kırmızı kan hücrelerine (eritrositler) karşı antikorları tespit etmek için kullanılır. Antikorları belirlemek için Coombs serumu kullanılır, tavşanların serumundan elde edilir ve insan antikorlarına duyarlı hale getirilir.
Test, hemolitik anemi, rhesus uyumsuzluğu veya kan transfüzyonundan kısa süre önce şüpheleniliyorsa kullanılır. Hemolitik anemi, bir anemi türüdür ve al yanaklı uyumsuzluk, bir kan grubu uyumsuzluğunu tanımlar.
İki farklı Coombs testi türü vardır, doğrudan ve dolaylı test, gösterge ve uygulama açısından farklılık gösterir.

Coombs testinin nedenleri

Hemolitik anemiden şüpheleniliyorsa doğrudan Coombs testi kullanılır. Hemolitik anemi, kan hücrelerinin hasar nedeniyle erken parçalandığı anemiyi tanımlar.
Sistemik lupus eritematozus, romatoid artrit veya kronik lenfatik lösemi gibi otoimmün hastalıklarda vücudun kendi kan hücrelerine (sözde eritrositler) yönelik antikorlar oluşur. Antikorların bağlanması, kan hücrelerinin erken parçalanmasına veya damarlardaki kan hücrelerinin kümelenmesine yol açar. Bunların her ikisi de hemoglobin değerinde düşüşe neden olur.

Direkt Coombs testi için bir başka endikasyon da haemolyticus neonatorum hastalığıdır, burada al yanaklı annenin vücudunda rhesus faktörüne karşı antikorlar oluşur. Doğmamış çocuk al yanaklıysa, anneden gelen antikorlar fetüsün dolaşımına girebilir ve oradaki kan hücrelerinin daha fazla parçalanmasını başlatabilir. Yenidoğanlar şiddetli anemi ve sarılık ile öne çıkıyor.

Coombs testi, transfüzyon tıbbında düzenli olarak kullanılmaktadır. Küçük bir kan örneğinin A, B, AB ve 0 kan gruplarından çeşitli serumlarla karıştırıldığı bir kan transfüzyonundan (yatak başı testi) önce kan gruplarını belirlemek için kullanılır. Kan sıvı kalırsa, hastanın kanı ilgili kan grubu ile uyumludur. Kan nakli gerçekleştirilebilir.

Dolaylı Coombs testi ayrıca hastanın vücudundaki serbest antikorları aramak için de kullanılabilir (antikor arama testi) örn. doğum kontrolleri sırasında, onkolojik hastalar veya halihazırda kan transfüzyonu almış kişiler için transfüzyona hazırlık olarak.

Konuyla ilgili her şeyi burada bulabilirsiniz: Rh intoleransı.

Hazırlık

Coombs testine hazırlık olarak, ilk önce test edilecek antikorlara sahip serumlar hazırlanır. Farklı test tüplerine doldurulur veya test kartlarına uygulanır.

Günlük klinik uygulamada, örn. yatakbaşı testi ile hemen kullanılabilecek önceden hazırlanmış test kartları vardır. Daha sonra hastadan kan alınır ve test için hazırlanır. Hangi tip Coombs testinin yapıldığına bağlı olarak, hastanın kan hücrelerine veya serumuna (kanın sıvı kısmı) ihtiyacı vardır.

Sekans

Doğrudan bir Coombs testi yapılırsa, kırmızı kan hücreleri hastanın kanından filtrelenir. Vücutta hemolitik anemiye veya kan grubu uyumsuzluğuna neden olan IgG tipi antikorların üzerlerinde olup olmadığı test edilecektir. Coombs serumu, insan IgG antikorlarına karşı antikorlar içerir. Karışım uzun süre ısıtılır (inkübe edilir). Kırmızı kan hücrelerinde antikor varsa topaklanır ve test pozitif olur.

Dolaylı Coombs testi iki bölümden oluşur. Amaç, kanda serbest kalan ve kan hücrelerine bağlanmayan antikorları belirlemektir.
Bu sefer sıvı kısım (serum) hastanın kanından süzülür. Öncelikle test için seruma kırmızı kan hücreleri eklenir. Serumda serbest antikorlar varsa kırmızı kan hücrelerine bağlanırlar. Bu tepki görünmez. Sadece ikinci adımda, direkt Coombs testinde olduğu gibi, insan antikorlarına karşı antikorlar içeren Coombs serumu eklenir ve ısıtılır. Burada da sonuç pozitifse çözüm kümelenir.

Değerlendirme

Antikorlar uygun bir Cooms serumu ile birleştirilirse, serumdaki (kanın sıvı kısmı) antikorlar hastanın antikorlarına bağlanır. Antikorlar Y şeklindedir, yani her zaman iki bağlayıcı partneri bağlayabilirler ve böylece kırmızı kan hücrelerini birbirleriyle çapraz bağlayabilirler. Büyük miktarda kan hücresi birikimi oluşur. Bu kümeler görünür hale gelir - kan aglütine olur (kümeler) ve test pozitiftir.
Hastada uygun antikorlar yoksa serum sıvı olarak kalır. Herhangi bir değişiklik göremezsiniz - test negatiftir.

Alternatifler neler?

Coombs testine bir alternatif, belirli antikorların bir enzim ile işaretlendiği immünolojik ELISA yöntemidir (enzime bağlı immünosorbent testi). Bu antikor test solüsyonuna eklenir. Etiketli antikorlar test çözeltisindeki antikorlarla reaksiyona girerse, bağlı enzim aktive olur ve bir boya üretir. İlgili test tüplerinin rengi değişir - test pozitiftir.

ELISA prosedürüne ek olarak, genellikle pozitif ELISA için doğrulama testi olarak kullanılan WESTERN blot da vardır.